气相色谱分析、分离的科学方法，被广泛应用于人类生产生活的方方面面。仪器是专业生产气相色谱仪、便携式色谱仪及相关色谱耗材（色谱进样垫、色谱柱、色谱进样针等）的厂家，生产的设备符合国家标准，在市场受到用户的青睐和认可。以下主要介绍气相色谱法检测活菌型乳酸菌饮料中乙醇质量浓度。

随着人们生活水平的提高，活菌型乳酸菌饮料逐渐受到广大人群的喜爱。活菌型乳酸菌饮料可以将乳糖降解为乳酸和小分子单糖，且能培植氨基酸和维生素，特别适合于乳糖不适宜人群食用，并且可以调理肠胃，消除肠道垃圾，增强人体免疫力和抵抗力。有研究表明日本和欧洲的乳酸菌饮料比例高达80%，而在中国该比例还不足5%。

近年来国内活菌型乳酸菌饮料产量逐渐增大，但由于在其生产过程添加乳酸菌菌种环节时极易受到酵母菌的污染，导致产品出现涨包，给企业带来极大经济损失。酵母菌发酵时产生大量二氧化碳和乙醇，本文通过对活菌型乳酸菌饮料中乙醇含量的测定可以间接的监控产品被酵母菌污染情况，对企业的实际生产有一定的指导意义。

1 实验

1.1 主要仪器

气相色谱仪,配氢火焰离子化检测器（FID），离心机。

1.2 试剂与耗材

无甲醇乙醇（色谱纯），乙腈（色谱纯），毛细管色谱柱。

1.3 样品前处理

吸取5 mL活菌型乳酸菌饮料待测样本于25 mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，混匀，转移至50 mL离心管中在5 000 r/min的转速下离心5min，取上清液过0.22μm有机滤膜，得到待测液，供气相色谱分析用。

1.4 色谱条件

色谱柱：CD-2560(100 m×0.25 mm×0.2μm)毛细管色谱柱；升温程序：初始温度80℃，保持1 min；以10℃/min升至150℃，保持2 min；进样口温度为180℃；检测器温度为200℃；进样体积为1μL；载气流速为2.0 mL/min；载气为高纯氮气（纯度99.999%）；分流比为20∶1。

2 结果与分析

2.1 标准曲线

准确称取无甲醇乙醇0.25 g于25 mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，配成乙醇质量浓度为10 mg/mL中间标准液。使用时分别吸取质量浓度为10 mg/mL中间液10，20，40，80，160μL于10 mL容量瓶中，分别用乙腈定容至刻度，摇匀，得乙醇质量浓度为1 mg/ 100mL，2 mg/100mL，4 mg/100mL，8 mg/100mL，16mg/100 mL 5个质量浓度梯度的标准工作液。

用气相色谱仪对标准溶液中乙醇进行检测，以峰面积y对其质量浓度x（mg/100 mL）得到乙醇的标准曲线y=30.223x+0.6754，R2=0.9998，其相关系数大于0.99，说明线性关系良好，其线性响应范围完全满足测定的要求。

3 检出限

国际纯粹与应用化学联合会(IUPAC)确定的检出限定义是：检出限为某特定方法在给定的置信度内可从样品中检出待测物质的最小浓度或量。它是表征分析方法的最主要的参数之一,分析方法随机误差的大小不但与仪器噪声有关,而且决定了方法全过程所带来的误差总和,与样品性质、预处理过程都有关系。

色谱分析过程中，人们通常将3倍的信噪比（S/ N=3）用来定性，10倍信噪比用来对目标化合物定量（S/N=10）。实验表明，空白基质添加乙醇在4 mg/ 100 mL时，信噪比（S/N=10）大于10，回收率和精密度令人满意，因此我们将4 mg/100 mL作为本研究方法的定量检出限。

本文建立了活菌型乳酸菌饮料中乙醇质量浓度的气相色谱检测方法。采用乙腈沉淀样品中蛋白质，离心后取上清液用强极性的CD-2560(100 m×0.25 mm×0.2μm)毛细管色谱柱分离，氢火焰离子化检测器检测，并以保留时间定性和峰面积定量。该方法简便、快速、实用、准确,方法的测定低限为4 mg/100 mL,可用于活菌型乳饮料中乙醇质量浓度的快速检测。

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